无缝克隆和组装技术是一种新的、快速、简洁的克隆方法，旨在克服上述缺陷，它可以在质粒的任何位点进行一个或多个目标DNA的片断的插入，而不需要任何限制性内切酶和连接酶。突破传统的双酶切再加上连接，只需要一步重组法，即可得到高效率克隆的重组载体。
1、位点选择灵活：载体任意位置基因克隆；
2、快速简便：省略酶切、割胶回收、酶连等过程，大约1h完成载体构建；
3、精确：不需要增加任何额外的程序；
4、克隆效率高，阳性克隆高达90%以上；
5、一次进行多片段目的基因的重组。