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PCR酶选择指南

浏览次数：35 日期：2023-09-01 16:20:52

PCR是分子生物学技术的基础，具有操作简便、快捷、灵敏度高等特点，是研究基因组学或后基因组学必备工具，因此在生物科学研究领域具有应用的广泛。从基因克隆、QTL基因定位、菌落分析、基因分型、下一代测序（NGS）到IVD诊断中的肿瘤筛查、癌症用药靶点筛查、病原体检测、液体活检、优生优育等，以及海关检验、法医侦查等，都离不开PCR技术的助力分析。那么，面对种类繁多的PCR酶，我们要如何选择，才能获得令人满意的PCR实验结果？在这里，选择一款合适的变得尤为重要。

PCR的概念及原理

PCR，即聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction），是指将一段目的基因序列经过n轮的扩增，放大2n-1倍。其原理如下图：

PCR酶的分类及选择

由于华美PCR酶种类繁多，为了便于大家更直观的了解本公司的产品，小编以思维导图的形式给大家呈现。

第一类：常规PCR扩增

常规PCR扩增，主要以基因分型、钓取目的基因或者基因定位，可以选择华美的普通Taq酶或者直扩Taq酶。另外，模板是RNA片段的，则第一步需要选择逆转录酶得到第一链cDNA，再选择合适的Taq酶进行下一步扩增。

常规普通PCR扩增

血液直扩

植物直扩（即将推出）

水稻叶片直扩基因分型

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第二类：高保真PCR扩增

如果扩增的目的基因，需要保证序列的保真度，将序列进行亚克隆进行后续的基因表达、功能验证等工作，则需要选择高保真酶。

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第三类：荧光定量PCR扩增

如果您想做染料法qPCR，可以选择华美专门优化的2×SYBR Green qPCR预混液（2×SYBR Green qPCR Mix）。

如果您想得到更精确的定量结果，可以选择探针法qPCR的试剂盒。华美2×TaqMan多重实时荧光定量预混液（2×TaqMan Multiplex qPCR Master Mix），组分经过优化，能⽤于多种qPCR环境，进行多重PCR扩增。

另外，如果模板是RNA，华美也推出了一步法RT-qPCR试剂盒。一步法RT-qPCR试剂盒（One Step RT-qPCR Kit ），采用了华美新一代的MMLV酶+高性能Taq酶的组合，能够为您呈现更优美的扩增曲线和更高的灵敏度。

这个大类里面要特别强调一个比较特殊的酶，即ARMS Taq酶，即扩增阻滞突变DNA 聚合酶（ARMS Taq DNA Polymerase）。

ARMS Taq DNA Polymerase是新一代抗体法热启动Taq酶，经基因工程改造而成，可以准确识别引物3’端单碱基错配，只需要在引物3’端设计一个识别碱基，即可以实现高度特异性的ARMS检测。该酶既适用于荧光PCR平台，又适用于最新的数字PCR平台。在该酶的基础上开发了2×Multiplex ARMS qPCR Mix具有很强的阻滞能力，能够有效进行ARMS-PCR介导的基因分型。其中缓冲液和Taq酶进行专门优化，含有扩增所需的离子及dNTPs等，无需额外添加。

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第四类：数字PCR扩增

什么是数字PCR？数字PCR（Digital PCR，dPCR），通过将待测样本进行极限稀释，使每个反应室中平均只有一个拷贝或者没有目标DNA分子，然后加入荧光信号进行PCR扩增，可以检测到低至一个拷贝的突变。

数字PCR是一种绝对定量的核酸检测方法。其和传统的qPCR具有相同之处，都需要模板、引物、探针、酶以及适合的扩增buffer体系等，都需要经过PCR扩增，使荧光信号富集；但是dPCR又和qPCR具有不同之处，qPCR的荧光信号是实时采集的，而dPCR信号是终点采集的，因此dPCR在PCR扩增阶段就是一个普通的PCR过程。由于dPCR的信号是终点采集，因此扩增完成后，可以根据需要在一定时间内进行信号采集，同时可以把多个批次的数据同步采集进行分析。

永利娱场城官网首页入口，与国内头部的数字PCR公司深度合作，即将推出多款数字PCR产品。

永利娱场城官网首页入口不仅可以为客户提供相关分子生物学产品，并且能够根据客户需求依托公司深厚的技术积累和研发创新实力，为客户提供个性化定制开发和针对性的系统解决方案，以客户为中心，全力满足客户需求。